Methodên DNA DNA

Di warê biotechnolojiya yek ji guhertineke berdewam e. Pêşkeftina mezinbûnê û pêşveçûna lêkolînê ya kevneşopî di nûjenbûnê û kapîtalîzma zanistên zanistî û kapasîteya wan de têkoşîna teknîk ên molecular a bingehîn dibînin û pêvajoyên nuh tên bicihkirin. Girtina PCR di gelek lêkolînên genetîk de, di nav deverên DNA de analîzkirin û nasnameyên cûda yên cuda yên li ser DNA-ê de têne vekirin.

DNA bi rêvegirtina me bi hêza me re tête ku bi karûbarên elektrophoresis bi karûbarên DNA cuda ve girêdayî ye ku ji hêla piçûk ve wekî piçûkek yek bingehek cuda ye.

DNA Sequencing

Di salên 1970-ê de, du teknolojiyên rêzikên DNA-ê yên dirêj ji hêla DNA-anolek ve hatin avêtin. Ev rêbazek (an jî dideoxy) û bûne ku rêbazê Maxam-Gilbert (paqijkirina kîmyewî). Methoda Maxam-Gilbert li ser kîloyên nûkleotide-taybet ên kîmyewî li ser kîmyewî ye û ji bo oligonucleotides çêtirîn (polîtîkên nucleotide-ê, bi gelemperî ji 50-ê-bîrtirîn di piçûktir e) tê bikaranîn. Methodê Pirrjimar bi gelemperî tê bikaranîn, çimkî ew teknolojî hêsan e ku hêsan e, hêsanî ya PCR û otomasyona teknîkî, hêsan bi hêsantirên DNA-ê di nav hin cinsan de têne bikaranîn. Ev teknîkî di dema dvdxynucleotides re-reaksiyonên dorpêçkirina PCR-ê de li ser derxistina zincê ye.

Methodê Sanger

Di rêbazê de, dînameya DNA ya analîzekirin tê bikaranîn, wekî polîtîkaya DNA tê bikaranîn, di nav pêvajoya PCRê de, ji bo kevneşopên gumanbarên hilberîner bikar bînin.

Bi çarçoveya reaksiyonên PCR yên cuda de amade bûn, her yek ji sedî perçeya dideoxynucleoside sêfleotides (ddNTP) bi yek ji nucleotides (ATP, CTP, GTP an TTP) pêk tê. Konseya nû ya DNA ya ku di nav van analogan de pêk tê de berdewam dike, berdewam dike, ku dema ku çuçik berê berê veşartî ye.

Reaksiyonek her PCR dê di encamên hevpeymanên cuda yên cuda yên DNA de hene, hemî bi nucleotide-ê ku ji bo reaksiyonê dideoxy vekirî tête derxistin. Gelo electrophoresis bi karanîna çar reaksiyonên çar çarçoveyên cuda hene, û di çarçoveya çarçeyên çar cuda de, û pêşnivîsa bingehîn ya bingehîn li ser bingeha ku kîjan kevirên ku bi nucleotide re bi dawî dibe tîne.

Li reaksiyonê xweya xweya xweya xweyî ya xweser, kevneşopan têne bikaranîn ku bi çar alîgirên fîlyon ên rengên cuda hene têne bikaranîn. Reaksiyonên PCR, di derheqê doktorên dideoxyên cuda yên cuda de, wekî jorê hatine nîşandan. Lêbelê, paşê, tevlîhevkirina çar reactionên wê bi hev re têne kirin û bi yekane yek ji gel. Çerm rengê her parçe tête bikaranîna bexşek laşê ye û agahdariya bi komputerek komê tête ku tête kromromografên ku her reng ji bo her rengî nîşan dide, ji kîjan şablonê DNA bi destnîşankirî tête birin.

Bi gelemperî, rêbazê rêkûpêk otomatîk tenê ji bo pêşniyarên herî zêde nêzîkî 700-800 bend-dirêj di binavê de rast e. Lêbelê, ev gengaz e ku rêzikên mezin ên genên mezin bigirin û, bi rastî, genomeyên tevahî, rêbazên gavên rêbaz ên mîna Primer Walking and Shotgun sequence.

Li Primer Walking , parçeyeke karûbar a jenek mezintir tê bikaranîna rêbazê Sanger. New primers ji beşa ewlehiyê ya pêşveçûnê têne çêkirin û bi karanîna perçeya jene ya ku ji riya reaksiyonên nifşî ve were berdewam kirin.

Peymana Shotgun di navnîşan de nirxandin ku dabeşkirina DNA ya berjewendiyên mêjî yên bêhtir (birêvebirin), hemî parçe kirin, û perçeyên armanca li ser serlêdanên bingehîn pêk tê. Ev teknîkî ji hêla bernameya komputerê ve ji bo pergalên berbiçav ve tête hêsan kirin.