Vê bêdeng ji bo dabeşkirina electrophoresis ya DNA
Bb buffer bi taybetî ji bo dabeşkirina piçûkên DNA yên biçûk (MW <1000) e, wekî hilberên piçûk yên enzyme digire.
TBE xwediyê kapîtaliyek mezintir heye û dê ji çareserkirina TAE- ê ve pêşniyarê rastîn bide . BAE buffer ji bo Trîsê, acic acid û EDTA (Tris-acetate-EDTA) çêkirî ye.
TBE gelemperî ji TAE-ê ve ye û li ser ligase DNA dike, dibe ku eger dibe ku pirsgirêkên DNA paqijkirin û tevgerên mecbûr in. Bi pêngavên sêyem ên ku li pey bistînin, fêr bibin ka çawa çêdibe TBE. Divê vê derê 30 deqîqeyan bêhtir bikişînin ku vê pêdivî ye. Li vir çawa ye:
Sazkirina Stock Stock ya EDTA
Divê çareseriya EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) divê pêşiya we amadekirin. EDTA ê heta ku heta ku pH têgihîştin 8.0 mebesta çareseriyê bi temamî neyê çareser kirin. Ji bo çareseriya stasyona 500-milliliter ya 0.5 M EDTA, 93.05 gramên hilberîna hilberîna EDTA (FW = 372.2) têxe. Piştre di nav 400 millilitersên ava deionized de hilweşînin û pH bi NaOH re peyda bikin. Piştî wê, çareseriyê bi hejmara dawîn ya 500 mîlan.
Pirsgirêka Stockê ya TBE amade bikin
Çareseriya bazarê (5x) ya TBE bi bîhnfirehiya 54 g Tris (FW = 121.14) û 27.5 g borîk acid (FW = 61.83) û hemî nêzîkî 900 mîlîtanên avê avê 900 mîlîtan ên hilweşandin. Piştre 20 milliliters ji 0.5 M EDTA (pH 8.0) û çareseriya xwe ya voluman ya 1 lîter bikin.
Ev çareserî dikare li avahiyê odeyê hilbijêre lê dê rahiştek dê di çareseriyên kevin de çêbikin. Daxistina şîrînan di şirketên çandî de bikirin û eger hebek çêkiriye ava kirin.
Çareserkirina Karkeriya TBE
Ji bo ji bo elektronosyonên agarose gel, Bafenderek TBE dikare li ser kêşeya 0.5x (1:10 kêmkirina hûrgelê ya navdar) tê bikaranîn. Pêveka danûstandinê 10x li avê vexwarinê hilweşînin. Piştgirên sivîl ên 45 mîlye Tris-borate û 1 m EDTA. Buffer nuha ji bo bikaranîna gel a agarose gel amadekar e.
Tu çi hewce ye
Ji bo bicîhkirina TBE, hûn tenê tenê çar materyalên hewce ne. Pirtûkên mayîn li ser vê lîsteyê ne. Wê çar pêdivî ne hewce ye ku EDTA xwarinê nexweşî, Tris bingeh, borîk acid û avê avê.
Ji bo ku pêwist, hûn ê pispor û pîvana pîvanê pêdivî ye. Ji bilî vê yekê, we hewce ye ku hûn 600-milliliter û 1500-milliliter bekers an jî flasks. Pêdivî ye ku hewceyên pêwistên pêdivî ye ku sivîlên kolektîf têne derxistin û barên keviran derxistin û pêlavan.
Pêwîste pirtûkan li li labê hûn kontrol bikin ku hûn bikar bînin ku hûn her tiştek hewceyê ku hûn hewce ne ku hûn dest pê bikin. Ji ber ku hûn ji materyalên maqûl vekişîna ji hêla amadebûna amadekirinê rawestîne, tiştek xirabtir e.
Ger labek li dibistan an malpera we ye, bi karmendên xwe re kontrol bikin ku bibînin ku hemû tiştên ku di hilberê de hene. Wusa ku hûn di dawiya we de û wextê we teserif bikin.