Ev Buffer Ji bo Tevgera DNA ya ku tê bikaranîn
Ev pişk xwedî hêza ionic heye û kapîtalek kêm kêm heye. Ew herî baş e ku electrophoresisên mezin (>> 20 kb) Dabeşên DNAê û hewceyê ku bi demjimêr dirêjtir (veguhestinê ya 4-h) ji nû ve veguherînek an jî dîsa veguherîne.
Bi vî awayî, hûn dikarin çend pişkên bêdeng bifikirin.
Têgihiştin ku bêdeng hêsan e ku hêsantir dike û gavên lezgîn dikarin bêne çêkirin, di dema demekê de bêtir bêkêşan çêbikin divê bi taybetî bi dem-xelet yan zehmet nebe. Bi karanîna jêrîn bi kar tînin, divê tenê 30 deqîqeyan bikişînin ku ji bo naveroka TAE-ê bikin. Li vir çawa ye:
Sazkirina Stock Stock ya EDTA
Saziya EDTA (etylenediamine tetraacetic acid) pêşiya pêşîn amadekirin. EDTA dê heta ku pH têgihîştin 8.0 ta tevahî çareserî çareser nakin. Ji bo çareseriya stasyona 500-milliliter ya 0.5 M EDTA, 93.05 gramên hilberîna hilberîna EDTA (FW = 372.2) têxe. Di 400-milliliters de ava ava deynî û pH bi sodium hîdroxide (NaOH) veguherînin. Ya bilindkirina çareseriya dahateya dawîn ya 500 mîlan.
Çareseriya Stockê ya TAE'yê vekin
Saziya bazirganiyê (50x) ya TAE'yê bi destê 242 gramên Tris (FW = 121.14) tête kirin û li nêzîkî 750 mîlîtanên avê yên dîyonîkirî hilweşînin.
Bi tevahî 57.1 millilitersên glacial acid û 100 milliliters 0.5 M EDTa (pH 8.0) balkêş bike. Piştî vê yekê, çareserkirina nimûneya dawî ya 1 lîterê bike. Ev çareserî hilbijêre dikare li avahiyê odeyê hilbijêre. PH ji vê pevçûnê nayê guhertin û divê di nav 8.5 de.
Pêşkeftina Çareseriya TAE'ê amade bikin
Çareserkirina xebata 1x TAE bafir bi hêsanî ya hilberê ya 50x di ava avê de ava kirin.
Piştgiriya dawîn 40 mîlyon in. Tris-acetate û 1 m EDTA. Buffer nuha ji bo bikaranîna gel a agarose gel amadekar e.
Çi tiştên ku ji bo hewceyê hewceyê hewce dike
Ji ber ku ji bafenderek TAE-ê tenê tenê pergala zû û hêsan e ku hewce dike, hejmara materyalên ku hewce ne ji bo hewce ne. Hûn bi tenê hewceyê hilberîna EDTA-ê xwêk, Tris bertek, û acîdê acikek glacial heye.
Pêdivîkirina pargîdan jî pêdivî ye ku pîvana pH û calibrasyonên pêdivî ye. Hûn dê 600 mîlître û hewldanên 1500 bexer û flasksan jî hewceyê hewceyê û herweha hemî cylindêrên kredî. Di dawiyê de, hûn hewceyê avê deonîkirin, hewlên kevir û hewlên hewl bidin.
Wrapping Up
Çima hûn plan dikin ku paqij bikin - li li malpera dibistan, malpera karker, yan cihê cihê din, wek mala we? Ji ber ku hûn dest pê bikin ku materyalên ku ji bo hemî jorên ji bo tixûbê TAE-ê ve destnîşan bikin.
Ger hûn nexwest ku ji bo materyalên drav bidin, lêgerîna ku ji bo derveyî derveyî xaniyê we re pêşniyar kirin. Hûn dikarin hêsantirên ku hûn hewce bike an jî biryare bikin an ji bo wan dikanek taybetmendiyê biçin.